Исследования




Скачать 75.85 Kb.
НазваниеИсследования
Дата публикации28.03.2014
Размер75.85 Kb.
ТипДокументы
uchebilka.ru > Информатика > Документы


м.Київ, вул.Васильківська 45 кор.2 к.410

тел.(044) 455-91-78

факс(044)455-70-77

info@cld.in.ua

www.cld.in.ua

__________________________________________________________________________________
Вниманию практикующих врачей!

Уважаемые коллеги!
Обращаем Ваше внимание, на то, что с 12 ноября 2013 г. лаборатория расширяет спектр лабораторных услуг в разделе прейскуранта «Полимеразная цепная реакция. Вирусные инфекции. Гепатит В».


Код

Название исследования

Метод

Клинический материал

030108

ДНК HBV, определение мутаций устойчивости к противовирусным препаратам

Секвенирование

Кровь с ЭДТА


Лекарственная устойчивость (резистентность) - природная или приобретенная способность возбудителя болезни сохранять жизнедеятельность при воздействии на него лекарственных средств. Как правило, этиотропное лечение хронического гепатита В (ХГВ) основывается на применении аналогов нуклеозидов/нуклеотидов - ингибиторов РНК-зависимой ДНК-полимеразы (обратной транскриптазы), которая кодируется Р-геном вируса гепатита В (HBV). Противовирусный препарат (ПВП) встраивается в вирусный геном в процессе обратной транскрипции, и конкурентно ингибирует вирусную репликацию, т.о. эти лекарственные препараты эффективно снижают вирусную нагрузку у больных ХГВ. При возникновении некоторых точечных мутаций в Р-гене аналоги нуклеозидов/нуклеотидов теряют способность встраиваться в растущую цепь ДНК вследствие конформационного изменения локуса связывания обратной транскриптазы.
Мутации лекарственной устойчивости подразделяются на 1) основные (первичные) – мутации, снижающие чувствительность к противовирусному препарату, и 2) компенсаторные (вторичные) – мутации, которые компенсируют функциональные дефекты активности полимеразы, связанные с появлением первичной мутации.
Мутации устойчивости определяются по номеру позиции аминокислоты в домене обратной транскриптазы, причем аминокислота дикого типа указывается слева от номера аминокислоты, вариант мутации устойчивости – справа. Например, M204I – замена метионина (М), аминокислоты дикого типа, в 204 положении домена обратной транскриптазы на изолейцин (I), наличие которого в данной позиции ассоциировано с возникновением мутаций лекарственной устойчивости к определенным противовирусным препаратам.
Информация о наличии мутаций лекарственной устойчивости в геноме вируса гепатита В окажет значительную помощь клиницисту в выборе препаратов противовирусной терапии (ПВТ), и, соответственно, будет способствовать более эффективному лечению ХГВ.
В ходе выполнения исследования проводятся:


  • Выделение ДНК из плазмы крови;

  • ПЦР-амплификация ревертазного домена Р–гена HBV;

  • Секвенирование полученного ПЦР-фрагмента ревертазного домена Р–гена HBV;

  • Выявление мутаций лекарственной устойчивости HBV с использованием программного обеспечения «ДЕОНА» (ООО «МедАйТи Групп», Россия);

  • Клиническая интерпретация полученных результатов.



^ Показания к назначению исследования

Исследование предназначено для больных ХГВ в определенных случаях перед началом противовирусной терапии (ПВТ) и во время приема противовирусных препаратов (ПВП) (см. Табл. 1)
Таблица 1

^ Показания к проведению исследования на наличие

мутаций устойчивости HBV к противовирусным препаратам


Срок

Показания

Перед началом ПВТ

Информация о предыдущем лечении ПВП отсутствует

Было прервано лечение аналогами нуклеозидов/нуклеотидов

Предыдущее лечение аналогами нуклеозидов/нуклеотидов было неэффективным

Во время проведения ПВТ

Выявлено наличие первичной резистентности1

Наблюдается вирусологический рецидив2


1Снижение концентрации ДНК HBV менее чем на 1 log10 от начального уровня на 12-ой неделе ПВТ.

2 Подтвержденное возрастание концентрации ДНК HBV более чем на 1 log10 от минимального уровня, достигнутого в процессе ПВТ.
^ Результат и интерпретация результатов исследования
В результате проведенного исследования врач получает информацию о наличии устойчивости вируса гепатита В к следующим противовирусным препаратам – ламивудину, телбивудину, энтекавиру, тенофовиру и адефовиру, а также информацию по каждой аминокислотной позиции, ассоциированной с мутацией лекарственной устойчивости. Результат исследования представлен в виде таблицы, состоящей из трех частей.
В первой части таблицы в графе «Результат» выдается результат «Готово» или «Не определено по причине низкой вирусной нагрузки».
Во второй части таблицы содержится информация о наличии устойчивости HBV к противовирусным препаратам. В этой части в графе «Результат» для каждого противовирусного препарата выдается результат R, S или I, где R – вирус гепатита В устойчив к противовирусному препарату (мутации устойчивости к этому препарату обнаружены), S - вирус гепатита В чувствителен к противовирусному препарату (референсное значение, мутации устойчивости не обнаружены), I – у вируса гепатита В возможно возникновение устойчивости к противовирусному препарату (т.е. выявлены только компенсаторные (вторичные) мутации устойчивости к этому препарату, основных мутаций не обнаружено).
Лекарственная устойчивость HBV к тем или иным противовирусным препаратам определяется в зависимости от выявленных мутаций, информация о которых содержится в третьей части таблицы. В этой части в графе «Результат» при выявлении мутации, выдается результат «Обнаружена...» (с указанием выявленной мутантной аминокислоты). Если такая мутация не выявлена, выдается результат «Не обнаружена». При выявлении в определенной аминокислотной позиции мутации, для которой не показана ассоциация с лекарственной устойчивостью, также выдается результат «не обнаружена».
^ Пример результата исследования


Параметр

Результат

^ Референсные значения

ДНК HBV, Определение мутаций устойчивости к противовирусным препаратам







Устойчивость к ламивудину




S

Устойчивость к телбивудину




S

Устойчивость к энтекавиру




S

Устойчивость к адефовиру




S

Устойчивость к тенофовиру




S

Мутации устойчивости

****************

****************

L80I/V




не обнаружена

I169T




не обнаружена

V173L




не обнаружена

L180M




не обнаружена

A181T/S/V




не обнаружена

T184A/C/G/I/L/M/S




не обнаружена

A194T




не обнаружена

S202I/C/G




не обнаружена

M204I/S/V




не обнаружена

I233V




не обнаружена

N236T




не обнаружена

M250I/L/V




не обнаружена

ПРИМЕЧАНИЕ

^ R – вирус гепатита В устойчив к противовирусному препарату

S – вирус гепатита В чувствителен к противовирусному препарату

I – у вируса гепатита В возможно возникновение устойчивости к противовирусному препарату



^ Условия транспортировки и хранения биоматериала


Забор материала

Забор крови следует производить натощак или через 3 часа после приема пищи в вакуумную систему с ЭДТА (фиолетовые крышки).

После взятия крови пробирку следует плавно несколько раз перевернуть вверх дном, чтобы кровь в пробирке тщательно перемешалась с антикоагулянтом.

NB! В противном случае кровь свернется, и выделение ДНК/РНК станет невозможным!

Условия хранения

В течение 1 часа при комнатной температуре, затем поместить в холодильник при Т=+2+80

Доставить в лабораторию в день забора.

NB!

Недопустимо замораживание образцов цельной крови!


Срок выполнения исследования составляет – 14 рабочих дней.
Стоимость исследования: 1350 грн.

Добавить документ в свой блог или на сайт

Похожие:

Исследования iconЗадачи исследования дизайн исследования тип исследования Общее описание...
Открытое исследование по изучению эффектив­ности и переносимости препарата Протефлазид производства 000 "нпк "Экофарм" у больных

Исследования iconТема Различные типы исследовательского дизайна при вторичном анализе данных
Кросс-секции и лонгитюды. Временные ряды. Сравнительные исследования. Поисковые исследования, оценочные исследования, консалтинговые...

Исследования iconПрограмма и основные этапы эмпирического исследования. Анализ, обобщение...
Мотивация трудовой деятельности личности, как объект социально – психологического исследования

Исследования iconПлан      Понятие «метод исследования». Классификация методов исследования....
Роль творчества в исследовательской деятельности. Мето­ды творческого решения проблемы исследования

Исследования iconПримеры работы с программой
Дата и время начала исследования: 12. 03. 2005 11: 27: 00. Продолжительность исследования: 05: 29: 05

Исследования iconМедицинская лаборатория «Диагностик Пастер» Телефон для информации:...
Материал для исследования: кровь. Условие забора: кровь для исследования рекомендуется сдавать утром натощак после 8-12 часового...

Исследования iconСравнительная педагогика. Педагогические исследования в великобритании...
Педагогические исследования в Великобритании осуществляются в основном в университетах, частично в научно-исследовательских организациях;...

Исследования iconАлександр Шохов Схема научного исследования в постнеклассической науке
Иными словами, если мы введем термин «область исследования», понимая под нею то, на чем сосредоточено внимание субъекта-исследователя,...

Исследования iconКурсовая работа: 34 с., 17 источников. Объект исследования
Цель исследования: исследовать особенности формирования психологического климата в коллективе

Исследования iconПлан маркетингового исследования продаж ноутбуков Введение
Голубков Е. П., "Маркетинговые исследования: теория, практика и методология", Москва 1998 г

Вы можете разместить ссылку на наш сайт:
Школьные материалы


При копировании материала укажите ссылку © 2013
контакты
uchebilka.ru
Главная страница


<